Studie zum Gennachweis von Hydrothorax, Aszites und Überstandsproben

Maligner Pleuraerguss (MPE), auch bekannt als Pleuraerguss, ist ein Pleuraerguss, der durch die Metastasierung von bösartigen Tumoren verursacht wird, die ihren Ursprung in der Pleura oder anderen bösartigen Tumoren haben, an denen die Pleura beteili

Hintergrund

Maligner Pleuraerguss (MPE), auch bekannt als Pleuraerguss, ist ein Pleuraerguss, der durch die Metastasierung von bösartigen Tumoren verursacht wird, die ihren Ursprung in der Pleura oder anderen bösartigen Tumoren haben, an denen die Pleura beteiligt ist. Fast alle bösartigen Tumore können in die Pleura eindringen und MPE produzieren, was häufiger bei Lungenkrebs, Brustkrebs, Magen-Darm-Krebs und anderen Krebsarten vorkommt[1].

Maligne Zellen im Pleuraerguss und/oder Pleuragewebe sind der „Goldstandard“ für die Diagnose von MPE. Die Studie berichtete, dass die Sensitivität der Pleuraergusszytologie bei der Diagnose von MPE 60,0 % (40,0 % ~ 87,0 %) betrug [2,3]. Seine diagnostische Leistung hängt von der Lokalisation des Tumors ab. Wenn es sich auf der Oberfläche von Pleuramesothelzellen befindet, können maligne Zellen leicht abfallen und in den Pleuraerguss gelangen. Nur wenige maligne Zellen werden in den Pleuraraum abfallen, wenn sie sich auf oder unter der serösen Schicht befinden. Die Mindestmenge an Flüssigkeit, die für eine zytopathologische Untersuchung benötigt wird, ist noch umstritten. Es wird allgemein davon ausgegangen, dass 20 bis 50 ml ausreichen. In der Literatur wird jedoch berichtet, dass die zur Untersuchung vorgelegte Flüssigkeitsmenge > 75 ml die Diagnoserate von MPE verbessern kann [4].

Untersuchung von Zellproben der Pleuraflüssigkeit beim Gennachweis

1.Im Jahr 2019 sammelte die Studie[5]des Peking University Cancer Hospital retrospektiv 295 MPE-Proben von Patienten mit Lungenadenokarzinom. 92 Patienten hatten übereinstimmende Gewebe- und Plasmaproben und 248 Patienten hatten Plasmaproben. Die Übereinstimmung zwischen dem Nachweis maligner Pleuraergusszellen und dem Gewebenachweis betrug 87,1 %. Die Sensitivität und Spezifität des EGFR-Mutationsnachweises von Pleuraergusszellen betrug 71,4 % und 96,5 %, was die EGFR-Mutation von Tumorgewebe besser widerspiegeln und die gezielte Behandlung von Patienten effektiv leiten könnte.

Vergleich der EGFR-Mutationsnachweisergebnisse zwischen MPE und Gewebe

2.Der Expertenkonsens zum Nachweis der EGFR-T790M-Genmutation bei chinesischen Patienten mit nicht-kleinzelligem Lungenkrebs[6] weist darauf hin, dass andere Proben wie z. B. tumorzytologische Proben oder Plasmaproben für EGFR T790M in Betracht gezogen werden können, wenn kein Gewebe entnommen werden kann Erkennung (Kategorie 2A).

Gennachweis von Pleuraerguss-Überstandsproben

1. Eine Studie[7] umfasste 63 Patienten mit metastasiertem Lungenkrebs (n=30, Kohorte 1) oder ohne übereinstimmendes Tumorgewebe (n=33, Kohorte 2). Von jedem Patienten wurden gleichzeitig PE- und Plasmaproben entnommen. Der Überstand und das Zellsediment von PE wurden jeweils behandelt, um cfDNA (PE cfDNA) und Sediment-DNA (sDNA) zu extrahieren. Die Ergebnisse zeigten, dass 98,4 % (62/63) der PE-cfDNA-Proben bei allen Patienten nachweisbare somatische Veränderungen aufwiesen, während 90,5 % (57/63) der PE-sDNA und 87 % (55/63) der Plasma-cfDNA nachweisbar waren. Das heißt, der ctDNA-Gehalt im Überstand des Pleuraergusses ist viel höher als der der Sedimentzellen des Pleuraergusses und weist eine höhere Mutationserkennungsrate und eine höhere Mutationserkennungshäufigkeit auf: Pleuraergussüberstand (98,4%) > Pleuraergusszellen ( 90,5 %).

Variationserkennung aller Patienten

2. Eine andere Studie[8] verwendete die Sequenzierungsmethode der zweiten Generation (NGS), um die Genmutation im Pleuraflüssigkeitsüberstand von Patienten mit Lungenadenokarzinom (n = 150) nachzuweisen. Alle 150 Proben erhielten genügend DNA, und 104 (90 %) von 116 Proben wurden erfolgreich auf NGS getestet. Somatische Mutationen wurden in 82 % der Proben nachgewiesen und klinisch relevante Mutationen wurden bei 50 % der Patienten gefunden. Der Vergleich der in Überstands- und Plasmaproben nachgewiesenen funktionsfähigen treibenden Mutationen zeigte eine Übereinstimmung von 84 %.

Schlussfolgerung: Der molekulare Gennachweis von Pleuraergussüberständen macht den routinemäßigen Gennachweis bequem. Es ist sehr reich an frischer Tumor-DNA, die wertvolle Proben für den Nachweis von Lungenkrebsgenen liefern kann. Insbesondere bei Patienten mit unzureichendem Tumorgewebe kann es die Ausfallrate der Generkennung reduzieren, den Erkennungszyklus verkürzen und wiederholte Biopsien vermeiden.

Überschneidung von klinisch relevanten operablen treibenden Mutationen, die zwischen FNA-Überstandsproben und dem entsprechenden Plasma-cfDNA-Flüssigbiopsie-Nachweis nachgewiesen wurden

Mustereinsendung zur Begutachtung

Für die Probeneinreichung wird der Pleuraerguss in einem 50-ml-Zentrifugenröhrchen, 30-50 ml für ein Tumor-Multi-Gen-Projekt, 15-20 ml für ein EGFR-Projekt gelagert und bei niedriger Temperatur transportiert.

In Empfehlung 6 des chinesischen Expertenkonsenses[9] zur Pleuraergussdiagnostik wird darauf hingewiesen, dass bei nicht-kleinzelligem Lungenkrebs mit MPE Tumorgewebeproben oder Pleuraergusssediment-Zellmassenproben zum Nachweis ausgewählt werden können.

Obwohl Hydrothorax-Proben eine sehr konsistente Nachweisleistung mit Gewebeproben beim Tumorgennachweis erbringen. Es ist jedoch unbestreitbar, dass die Nachweisrate von Operations- oder Punktionsproben an der Tumorstelle besser ist als die von Pleuraergusszellen oder Überstandsproben Hinsichtlich der Probenauswahl empfiehlt der chinesische Expertenkonsens zur klinischen Anwendung der Sequenzierungstechnologie der zweiten Generation bei NSCLC weiterhin, dass die Gentests von Tumorpatienten die erste Wahl für Gewebetests sein sollten. Bei unzureichenden Gewebeproben oder unzugänglichen Geweben kann die Flüssigbiopsie als ergänzendes Mittel gewählt werden [10].

Kernpunkte des Konsenses chinesischer Experten zur klinischen Anwendung der Sequenzierungstechnologie der zweiten Generation bei NSCLC

Für Projekte im Zusammenhang mit biologischem Lungenkrebs von Feishuo, wie z zur Erkennung verwendet werden. Für Einzelheiten kontaktieren Sie bitte, um Kooperationsangelegenheiten zu besprechen.

Referenz:

[1]Medicina (Kaunas). 15. August 2019;55(8):490.

[2]DOI: 10.1136/thx.2010.136978.

[3]Can Respir J, 2020, 2020: 2950751.

[4]Cancer Cytopathol, 2014, 122(9): 657-665.

[5]Lungenkrebs. 2019 Sep;135:116-122.

[6]Expertenkonsens zum Nachweis der EGFR T790M-Genmutation bei chinesischen Patienten mit nicht-kleinzelligem Lungenkrebs

[7]Theranostik 2019; 9(19): 5532-5541.

[8]Annals of Oncology 30: 963–969, 2019

[9]Chinesischer Expertenkonsens zur Diagnose von Pleuraergüssen

[10]Chinesischer Expertenkonsens zur klinischen Anwendung der Sequenzierungstechnologie der zweiten Generation bei NSCLC (Version 2020)