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Die phagozytische Aufnahme von Phrodogreen-Zymosan-Partikeln durch hiPSC-abgeleitete Mikroglia- Cellbox VS Inkubator

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Bestimmen | Experiment Übersicht

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Mikroglia spielen eine entscheidende Rolle bei der Immunantwort des Nervensystems. Ihre potenzielle und prognostizierte Rolle bei Krankheiten ist derzeit ein zentrales Forschungsthema. Da immer mehr Forschungsgruppen auf der ganzen Welt zusammenarbeiten, wird es immer wichtiger, hochwertiges biologisches Material auszutauschen. Dieser Benutzerbericht vergleicht die Morphologie und die phagozytische Aktivität von Mikroglia, die in der Cellbox transportiert werden, mit denen, die in einem stationären Inkubator gezüchtet werden.

"Die Cellbox kann sicher verwendet werden

für den Transport von menschlichen

iPSC-abgeleiteten Mikroglia, die sehr

sehr empfindliche Zellen, von einem

von einem Labor zum anderen."

DAS PROJEKT

Die Fähigkeit der Mikroglia, zu wandern, erfordert eine komplexe 3D-Matrix. Mit zunehmender Komplexität steigt auch die Anforderung an den Transport der Zellen in ihren kokultivierten 3D-Strukturen. Dieser Anwenderbericht ist der erste Schritt zur Erforschung eines neuen Weges für den Transport dieser empfindlichen Zellen. Durch den Vergleich der Mikroglia nach dem Transport in einer kontrollierten Umgebung mit einer Kontrollgruppe aus einer stationären Einheit soll in diesem Anwenderbericht festgestellt werden, ob die Cellbox ein plausibles Transportmittel für komplexere Strukturen ist.

Dieser Bericht basiert auf zwei Experimenten (I & II) (siehe Experimentablauf unten). In Experiment I wurden menschliche iPSC-Mikroglia in einer stationären Cellbox (A) und in einem stationären Inkubator (B) 18 Stunden lang kultiviert. In Experiment II wurde die Cellbox mit hiPSC-Mikroglia beladen und für 48 Stunden transportiert (C). Als Kontrolle wurden Mikroglia in einem stationären Inkubator für 48 Stunden kultiviert (D). Nach den Experimenten I und II wurde die Morphologie der Mikroglia mittels Hellfeldmikroskopie beobachtet, während die phagozytische Aufnahmeaktivität nach 24-stündiger Inkubation mit pHrodo™ Green Zymosan-Partikeln mittels Fluoreszenzmikroskopie-Analyse quantifiziert wurde.

DAS ERGEBNIS

Die Inkubation von Mikroglia aus humanen iPSC in der Cellbox (ohne Transport) verändert weder die Morphologie noch die phagozytische Kapazität im Vergleich zu Mikroglia aus humanen iPSC, die in einem stationären Inkubator gehalten werden. Der Straßentransport von humanen iPSC-Mikroglia in der Cellbox (zwei Transporte: von Belgien nach Deutschland und von Deutschland zurück nach Belgien) verändert weder die Morphologie noch die phagozytische Kapazität im Vergleich zu humanen iPSC-Mikroglia, die im stationären Inkubator gehalten werden. Darüber hinaus wurde auch keine offensichtliche Zellablösung beobachtet.

- August, 2021