Warum wird qPCR weltweit für COVID-19-Tests verwendet?

Was sind seine technischen Vorteile?

Mit der Routineisierung von COVID-19-Tests wurde qPCR, eine Spitzentechnologie in der Molekulardiagnostik, allmählich universell. Diese Technologie hat viele technische Vorteile gegenüber der traditionellen PCR und ist damit weltweit der Goldstandard für COVID-19-Tests. Was sind die Vorteile der qPCR, die sie universell verfügbar machen und ihre hervorragende Zuverlässigkeit bewahren?

Vorteile der qPCR

1. Geringes Risiko: Der Deckel wird während des gesamten Prozesses nur zweimal geöffnet, sodass das Risiko einer Laborkontamination gering ist;

2. Einfache Bedienung: Die Bedienung ist im Vergleich zu den langwierigen Bedienungsschritten von mNGS einfacher, was die Förderung erleichtert;

3. Schnell: amplifizierte DNA wird während der qPCR-Reaktion nachgewiesen, sodass sie nicht wie bei der herkömmlichen PCR separat (z. B. auf Sepharose) nachgewiesen werden muss;

4. Hohe Effizienz: qPCR gilt als hocheffiziente Methode und kann in Verbindung mit automatisierten Liquid-Handler-Workstations eine große Anzahl von Proben in kurzer Zeit verarbeiten;

5. Hohe Empfindlichkeit: qPCR ist in der Lage, einen 2-fachen Unterschied in der Anzahl der Ziel-DNA zu unterscheiden, und es kann nur wenige der ursprünglichen DNA-Moleküle erkennen. QPCR benötigt nur 1/1000 der Menge im Vergleich zu PCR;

6. Breites Quantifizierungsspektrum: Es kann ein breites Spektrum in mehreren Größenordnungen quantifiziert werden;

7. Reproduzierbarkeit: Es wird normalerweise als hochgradig reproduzierbar angesehen.

Anwendungen der qPCR

Viele Menschen haben vielleicht nur durch COVID-19-Tests ein grundlegendes Verständnis von qPCR, aber ihre Anwendung kann tatsächlich nicht auf COVID-19-Tests beschränkt werden. Aufgrund der offensichtlichen technischen Vorteile hat die qPCR ein breites Anwendungsspektrum. Da die qPCR eine lange Geschichte hat, haben verschiedene Studien ihre Zuverlässigkeit und Stabilität bewiesen. In ähnlicher Weise haben Hersteller von qPCR-Cyclern unterstützende Plattformen entwickelt, und Anbieter von automatisierten Liquid-Handling-Geräten haben automatisierte Lösungen entwickelt, die mit qPCR kompatibel sind.

Am häufigsten wird qPCR in der Molekulardiagnostik verwendet, wo sie traditionelle Methoden (mikroskopische Bilder) langsam ersetzt. Es wird verwendet, um die Mikroorganismen (Bakterien, Viren und Pilze), die Krankheiten verursachen, nachzuweisen, zu identifizieren und zu quantifizieren. Mit qPCR wird die manuelle Arbeit reduziert. Es ermöglicht die Verarbeitung einer großen Anzahl von Proben in kurzer Zeit (bis zu 384 oder sogar 1536 Reaktionen pro Lauf) und ist eine unersetzliche Methode in diagnostischen Labors. Es muss jedoch beachtet werden, dass das Verfahren nur das Vorhandensein von DNA oder RNA von Mikroorganismen nachweist, nicht ihre Lebensfähigkeit. Daher werden in Verbindung mit der PCR manchmal immer noch traditionelle mikrobiologische Techniken benötigt. Darüber hinaus sind Genexpressionsstudien ein weiteres sehr wichtiges Anwendungsgebiet der qPCR, die uns helfen können, verschiedene Bereiche der Biologie, Mikrobiologie, Medizin und anderer Biowissenschaften zu verstehen.