{{{sourceTextContent.title}}}

Nach der Lektüre dieses Artikels können Sie nicht behaupten, Sie würden die PCR-Technologie nicht kennen

{{{sourceTextContent.subTitle}}}

Nach der Lektüre dieses Artikels können Sie nicht behaupten, Sie würden die PCR-Technologie nicht kennen

{{{sourceTextContent.description}}}

Nachdem Sie diesen Artikel gelesen haben, können Sie nicht behaupten, Sie würden die PCR-Technologie nicht kennen

I. Was ist PCR?

PCR, die Abkürzung für Polymerase-Kettenreaktion, ist eine Methode zur Vervielfältigung von einigen wenigen oder zehn Kopien der DNA auf Millionen von Kopien und ist eine der wichtigsten Technologien überhaupt. Die PCR wird in großem Umfang bei Vaterschaftstests und strafrechtlichen Ermittlungen eingesetzt.

Die PCR kann als eine Technik betrachtet werden, die dem Prozess der DNA-Replikation in Zellen ähnelt, der zur Produktion neuer komplementärer DNA-Fragmente führt, wobei die ursprüngliche DNA als Vorlage dient. Die Replikation von DNA in Zellen ist ein sehr komplexer Prozess. Eine Vielzahl von Faktoren ist an der Replikation beteiligt. Die PCR ist eine DNA-Replikationsreaktion, die in einem Reagenzglas durchgeführt wird. Das Grundprinzip ähnelt der intrazellulären DNA-Replikation, aber das Reaktionssystem ist relativ einfach.

II. Grundprinzip der PCR

Das Grundprinzip der PCR besteht darin, die zu amplifizierende DNA als Matrize zu nehmen, ein Paar Oligonukleotidfragmente, die zu den 5′- und 3′-Enden der Matrize komplementär sind, als Primer zu verwenden, unter der Einwirkung der DNA-Polymerase entlang des Matrizenstrangs nach dem Mechanismus der halbkonservierten Replikation bis zum Abschluss der neuen DNA-Synthese zu verlängern und diesen Vorgang zu wiederholen, um das Ziel-DNA-Fragment zu amplifizieren.

III. Grundlegende Schritte der PCR

① Denaturierung: Erhitzen Sie das Reaktionssystem auf 95°C, um die gesamte Template-DNA in einzelsträngige DNA zu denaturieren

② Annealing: Verringern Sie die Temperatur auf die geeignete Temperatur, um die Primer an die Template-DNA zu binden

③ Verlängerung: Erhöhen Sie die Temperatur auf 72 °C, und die DNA-Polymerase katalysiert die Synthesereaktion der DNA mit dem dNTP-Substrat.

Die oben genannten drei Schritte werden als Zyklus bezeichnet, und ein solcher Zyklus wird 25-30 Mal wiederholt, um eine große Menge an Ziel-DNA zu erhalten.