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Gemeinsame Vorgehensweisen bei der Zentrifugation im Labor

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In diesem Artikel finden Sie gängige Vorgehensweisen bei der Zentrifugation im Labor

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Die Zentrifugation von Zellen ist ein unverzichtbarer Schritt bei gängigen Zellexperimenten. Er ermöglicht es, dass sich anhaftende Proben vollständig am Boden des Röhrchens absetzen, und trägt zur Bestätigung der Zellkonzentration bei. Die zentrifugierten Proben können für nachfolgende Experimente wie Primärzellkulturen, Zellpassagen, Einzelzellsequenzierung usw. verwendet werden.

Je nach Art der Zellen und Organellen sollten unterschiedliche Ansätze für die Zentrifugaltrennung gewählt werden.

Welches sind nun die gängigen Ansätze für die Zellzentrifugation?

01 Differenzialzentrifugation

Bei der Differenzialzentrifugation werden Partikel unterschiedlicher Größe und Form in einem heterogenen Gemisch auf der Grundlage der Sedimentationsrate der Partikel unter allmählicher Erhöhung der Zentrifugalkraft getrennt. Sie wird in der Regel zur Trennung von Laborproben verwendet, z. B. von Organellen wie Mitochondrien, Chloroplasten, Proteinen und Viren.

Trennungsschritte

Schritt 1: Stellen Sie eine relativ niedrige Geschwindigkeit ein, damit sich die Partikel mit hoher Dichte am Boden des Röhrchens absetzen können, während die mittelgroßen Partikel in der Mischung noch im Überstand suspendiert sind.

Schritt 2: Sammeln Sie das Sediment. Der in Schritt 1 entstandene Überstand kann bei höherer Geschwindigkeit zentrifugiert werden, um relativ mittelgroße oder kleine Partikel abzutrennen usw.

02 Dichtegradientenzentrifugation

Die Dichtegradientenzentrifugation, die auch als Zonenzentrifugation bezeichnet wird, umfasst die Ratenzonenzentrifugation und die Isodensitätszentrifugation.

1. Raten-Zonenzentrifugation

Die Ratenzonenzentrifugation wird in der Regel verwendet, um Zellen oder Organellen mit ähnlicher Dichte, aber unterschiedlicher Größe zu trennen. Geben Sie zunächst die Dichtegradientenmedien wie Saccharose, Glycerin, CsCl und Percoll in das Zentrifugenröhrchen. Dabei ist zu beachten, dass die Dichte der Probenpartikel höher sein muss als die Dichte an einem beliebigen Punkt in der Gradientenflüssigkeitssäule. Da die abgetrennten Partikel unterschiedliche Sinkgeschwindigkeiten in der Gradientenflüssigkeit haben, können die verschiedenen Komponenten in der gemischten Probe ihre jeweiligen Zonen an verschiedenen Positionen der Gradientenflüssigkeitssäule bilden, so dass eine Trennung während der Zentrifugation erfolgt.

2. Isodensitätszentrifugation

Die Isodensitätszentrifugation wird zur Trennung von Partikeln mit unterschiedlicher Dichte eingesetzt. Bei ausreichender Zentrifugalkraft und Zeit können sich Zellen oder Organellen in einem kontinuierlichen Gradientenmedium mit der gleichen Dichte absetzen oder aufschwimmen. Die Trennung wird erreicht, wenn die Zellen bleiben und ein Gleichgewicht erreichen. Als Medium wird häufig Percoll verwendet, aber auch mit CsCl, Cs2SO4 und Triiodoformyl-Glucosamin lassen sich nach längerer Zentrifugation stabile Gradienten erzielen.

Die RWD High-Speed Benchtop-Kühlzentrifuge bietet eine intelligente Zentrifugation, die sich mit einer Geschwindigkeit von bis zu 18.000 Umdrehungen pro Minute (30.000×g) an verschiedene Anwendungen von Mikro- bis zu mittlerem Durchsatz anpassen lässt. Sie bietet eine große Auswahl an Rotoren und Adaptern (Ausschwingrotoren und Festwinkelrotoren), um den unterschiedlichen Anforderungen der Kunden gerecht zu werden. Die Kapazität des M1416R reicht von 24 x 2mL bis 4 x 400mL, und der Plattenrotor eignet sich auch für PCR- und Deep-Well-Platten. Darüber hinaus ist der M1416R mit einem 7-Zoll-Touchscreen ausgestattet, der eine visuelle Bedienung und ein personalisiertes Kontoverwaltungssystem für eine effiziente Qualitätskontrolle ermöglicht.

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