So verbessern Sie die Erfolgsrate der MCAO-Modellkonstruktion？

Dieser Artikel stellt Ihnen das Verfahren und die wichtigsten Punkte vor, die Ihnen helfen, Ihre Erfolgsquote zu verbessern.

(1) Fixieren Sie die anästhesierte Ratte auf dem Operationstisch in Rückenlage. Rasieren Sie die Operationsstelle und führen Sie eine Desinfektion durch. Verwenden Sie die herkömmliche ophthalmologische Schere oder das Skalpell, um einen Einschnitt in der Mitte des Halses zu erstellen, und verwenden Sie dann eine Pinzette, um eine stumpfe Dissektion des Drüsengewebes und der Faszien durchzuführen, um CCA, ECA und ICA freizulegen und zu trennen.

(2) Trennen Sie die ICA und die entsprechende Pterygopalatinarterie. Verwenden Sie die chirurgische Naht, um die Pterygopalatina-Arterie mit einem Gleitknoten zu ligieren, oder klemmen Sie die Pterygopalatina-Arterie direkt mit einer Gefäßklemme. Diese Operation könnte das Einführen einer Naht in die Pterygopalatinarterie vermeiden und sicherstellen, dass die ICA der einzige offene Zweig der CCA ist.

(3) Trennen Sie den ECA-Stamm und verwenden Sie den elektrischen Gerinnungsstift, um den ECA-Zweig zu blockieren. Ligieren Sie das distale Ende von ECA und schneiden Sie es ab. Klemmen Sie die CCA und ICA mit arteriolaren Klemmen, um Blutungen zu vermeiden, bevor Sie mit einer Augenschere einen "V" -förmigen Einschnitt auf der ECA erstellen. Den vorbehandelten Faden mit Silikonkopf vorsichtig durch die ECA einführen.

(4) Führen Sie nach dem Entfernen der ICA-Arteriolenklemme die Naht in die MCA ein, um das Ende in einer Tiefe von etwa 17-18 mm zu erreichen (siehe Abbildung unten). Die empirisch geschätzte Tiefe hängt laut Autor vom Gewicht des Tieres ab. Beispielsweise beträgt die Einführtiefe für Ratten zwischen 260 g und 280 g etwa 17 mm; bei Ratten über 280 g sind es etwa 18 mm. Kurz gesagt, ein leichter Widerstand stellt ein Signal dar, da er anzeigt, dass die Naht gerade in die intrakranielle vordere Hirnarterie eintritt und die Öffnung der MCA blockiert.

(5) Verwenden Sie das Laser-Speckle-Imaging-System, um den Blutfluss der Großhirnrinde nach der Operation zu überwachen. 70% ~ 80% Abnahmen des Blutflusses weisen auf die erfolgreiche Etablierung des Modells hin.

(6) Nähen Sie das subkutane Gewebe und die Haut nach Ligatur und Desinfektion. Setzen Sie die Ratte wieder in den Käfig, nachdem sie sich von der Anästhesie erholt hat.

(7) Nur durch Herausziehen der Naht, damit der Silikonkopf zur ECA zurückkehren kann, kann der Blutfluss der MCA wiederhergestellt werden, da der Blutfluss von der CCA in die MCA reperfundiert werden kann.

(8) Das Kontrollgruppenmodell folgt fast dem gleichen Verfahren, wobei der einzige Unterschied darin besteht, dass die Naht nicht nach der Gefäßtrennung eingeführt wird und subkutanes Gewebe und Haut nach Ligatur und Desinfektion genäht werden können.

Das Maus-MCAO-Modell wird ähnlich wie das Rattenmodell erstellt. Anstatt die Pterygopalatinarterie zu ligieren, sollte der Operateur den Winkel sorgfältig anpassen, um die Pterygopalatinarterie beim Einführen der Naht zu vermeiden. Wählen Sie eine geeignete Naht basierend auf dem Tiergewicht und führen Sie sie in die ICA (10 ± 0,5) mm ein, um sicherzustellen, dass die Naht nur in die intrakranielle vordere Hirnarterie eindringt und die MCA-Öffnung blockiert.

Wie kann die Sterblichkeit in Tiermodellen der zerebralen Ischämie reduziert werden?

Der Präsident der World Stroke Organization und ehemaliger Chefredakteur von Stroke erklärt in der Aktualisierung der vorklinischen Empfehlungen des Academic Industry Roundtable Stroke Therapy:

„Wenn der Schweregrad der Ischämie eine bestimmte Schwelle für die Aufnahme erreichen muss (z. B. eine vorab festgelegte Abnahme der Durchblutung, die mit der Laser-Doppler-Flowmetrie festgestellt wird, oder die Entwicklung einer neurologischen Beeinträchtigung eines bestimmten Schweregrads), sollte dies klar angegeben werden. Normalerweise sind diese Kriterien sollte vor der Zuordnung zu den Versuchsgruppen angewendet werden.Wenn eine vorgegebene Läsionsgröße für den Einschluss erforderlich ist, sollte diese genau angegeben werden, ebenso wie die entsprechenden Ausschlusskriterien.

Fokaler ischämischer Schlaganfall bei Tieren wird typischerweise durch Okklusion der mittleren Hirnarterie induziert. Die Modelle des Verschlusses der mittleren zerebralen Arterie, einschließlich der Naht- und Embolieverfahren, sind jedoch unvollkommen, um eine anhaltende Verringerung des Blutflusses zu bewirken. In einigen Situationen ist es möglich, dass ein Verschluss auftritt, aber eine spontane Reperfusion folgen kann, was zu einer Variabilität der Infarktgröße führt. Grundlegende physiologische Parameter wie Blutdruck, Temperatur, Blutgase und Blutzucker sollten routinemäßig überwacht werden. Die Temperatur sollte innerhalb des normalen physiologischen Bereichs gehalten werden. Es ist wichtig, den zerebralen Blutfluss mithilfe von Doppler-Fluss- oder Perfusionsbildgebung zu überwachen, um eine angemessene anhaltende Okklusion zu dokumentieren und die Reperfusion in temporären Ischämiemodellen zu überwachen.“[1]

Verweise

[1]Fisher M, et al. Schlaganfall, 2009