Automatische Übersetzung anzeigen
Dies ist eine automatisch generierte Übersetzung. Wenn Sie auf den englischen Originaltext zugreifen möchten, klicken Sie hier
#Neues aus der Industrie
{{{sourceTextContent.title}}}
Die neuesten Thermocycler für hohen Durchsatz
{{{sourceTextContent.subTitle}}}
Sowohl Echtzeit- als auch Endpunkt-basierte PCR-Studien können von der zunehmenden Automatisierung mit Thermocyclern mit hohem Durchsatz profitieren
{{{sourceTextContent.description}}}
Während der Anstoß für den gegenwärtigen Vorstoß zu immer größerem Durchsatz und Automatisierung in den Biowissenschaften mit den koordinierten Bemühungen zur Sequenzierung des menschlichen Genoms begann, haben parallele Strategien zur Identifizierung und Charakterisierung von genetischen Expressionsmustern, sowohl in Echtzeit als auch an experimentellen Endpunkten, ein analoges Wachstum von durchsatzgesteuerten Technologien ausgelöst, das weiterhin mit großer Geschwindigkeit voranschreitet.
In den späten 1990er Jahren begann Roche sein LightCycler 480 System anzubieten, um die thermischen Zyklen, die Detektion und die Analyse der Schwellenwerte für die Genexpression in quantitativen Reverse-Transkriptase-PCR (qPCR)-Assays zu potenzieren. Die Fähigkeit dieser Systeme, aussagekräftige Transkriptionsdaten zu liefern, basiert auf der Therma-Base-Technologie, die in ihrem plattenbasierten Modul eingesetzt wird und ein hohes Maß an thermischer Stabilität und Homogenität über Multiwell-Platten hinweg gewährleistet. Der Motor für die schnellen und vorhersagbaren Temperaturänderungen liegt in einer Platine mit Peltier-Elementen, dem bewährten Standard für die meisten platten- und plattformbasierten Thermocycler.
Der Peltier-Effekt tritt auf, wenn an der Verbindungsstelle zwischen zwei ungleichen Halbleitern, durch die ein Strom fließt, Wärme absorbiert oder abgegeben wird. Ein Peltier-Element ist in der Regel in einen leitfähigen Metallblock eingebaut, mit einer ventral angrenzenden gerippten Senke, durch die Wärme abgeleitet werden kann. Die Erwärmung bzw. Abkühlung kann über die Höhe und Richtung des Stroms angesteuert und geregelt werden.
Neueste Entwicklungen bei Thermocyclern
Roche hat den LightCycler mit einer erhöhten Kapazität von maximal 384-Well auf 1.536-Well-Platten aktualisiert, was eine Verbesserung des Durchsatzes pro Assay um das Vierfache bedeutet. Im Einklang mit dieser Erhöhung haben sich die Volumina pro Reaktion erheblich verringert, mit einem Maximum von zwei Mikrolitern, gegenüber 10 Mikrolitern beim 384-Well-Format.
Es gibt Durchsatz, und dann gibt es Durchsatz. Obwohl Peltier-Elemente vorhersehbare und schnelle Temperaturrampen liefern können, kann die ständige Belastung, die mit der Aktivierung und Umkehrung ihres Potenzials einhergeht, dazu führen, dass sie mit der Zeit kaputt gehen, und die abgegebene Wärme, die abgeführt werden muss, kann den funktionalen Fußabdruck von qPCR-Cyclern weit über ihre gemessene Kubikzahl hinaus erweitern. Alternativ können die Platten durch wasserbasierte Thermocycler mit mehreren Kammern bewegt werden, die stabile Temperaturen in diskreten Bädern aufrechterhalten und somit die mit den Temperaturrampen der Peltier-Elemente verbundene Zeit um bis zu 40 Prozent reduzieren.
Es sind mehrere Wasserbad-Cycler für hohen Durchsatz erhältlich, die 96-Well-, 384-Well- oder 1.536-Well-Platten in schneller Folge einsetzen können. Zusätzlich können sie die ultimative Lösung für die automatisierte PCR aufnehmen, das Array Tape, das Platten überflüssig macht und aufgrund seines geringen Volumens und seiner geringen thermischen Masse fast kontinuierlich wie ein Zeitungsblatt unter einer Druckmaschine laufen kann. Dies sind Endpunkt-Maschinen, die für die Standard-PCR optimiert sind. Als solche sind sie prädestiniert für die Übernahme von Workflows für groß angelegte Analysen wie die Kartierung genetischer Interaktionen oder KASP-Assays zur Identifizierung seltener Einzelnukleotid-Polymorphismen in neuen Biomarkern.
Der Hydrocycler2 von Biosearch Technologies/LGC verwendet eine Zirkulationsdüse, um homogene Wassertemperaturen aufrechtzuerhalten und den Strahlungsrandeffekt zu eliminieren, der oft die Konsistenz von Hochdurchsatz-PCR-Assays beeinträchtigt. Es kann 145.000 Proben pro Arbeitstag verarbeiten und lässt sich in automatisierte Arbeitsabläufe mit Liquid-Handler und Roboterarmen einbinden, um Platten oder Array Tape von Bad zu Bad zu transportieren. Das Soellex-Gerät verbessert diese Zahl mit einer Kapazität von 230.400 Proben durch Iteration von drei Array Tape-Spulen mit 200 x 384-Well-Arrays pro Spule. Für Labore, die ihre genetischen Analysen automatisieren wollen, gibt es attraktive Optionen sowohl für Echtzeit- als auch für Endpunkt-Assays, in Konfigurationen, die für den Labortisch geeignet sind.